本文標(biāo)題："后固定一般用鋨酸超薄切片經(jīng)鈾一鉛復(fù)染后電鏡觀察"

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后固定一般用鋨酸超薄切片經(jīng)鈾一鉛復(fù)染后電鏡觀察

    后固定一般用鋨酸，超薄切片經(jīng)鈾一鉛復(fù)染后電鏡觀察。
但復(fù)染除有模糊重要細(xì)節(jié)的危險(xiǎn)外，復(fù)染溶液對(duì)細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)
產(chǎn)物有劇烈的作用。曾在腎上膝位質(zhì)進(jìn)行乙酰膽堿醋腳反應(yīng)，
一張切片不復(fù)染作對(duì)照，一張切片用枸櫞酸鉛室溫染5min，結(jié)
果每個(gè)軸突周邊的大部分有增強(qiáng)的AChE染色。
    一張切片用醋酸雙氧鈾酒精溶液60℃染10min，大部分AChE
反應(yīng)產(chǎn)物從袖突上脫掉。所以，電鏡酶細(xì)胞化學(xué)應(yīng)避免進(jìn)行復(fù)染，
只有確證復(fù)染不干擾其結(jié)果的情況下，才采用復(fù)染以提高反差。
    不復(fù)染的切片反差太弱，電鏡照片結(jié)構(gòu)模糊。用亞鐵氰化
鉀還原鋨酸代替一般鋨酸進(jìn)行后固定，可獲得較好的反差，避免
了復(fù)染。后固定時(shí)配制3%亞鐵氰化鉀水溶液(現(xiàn)配現(xiàn)用)和2%鋨酸
水溶液(常規(guī)電鏡保存液)，兩液等量混合，立即用于后固定。4℃
或室溫下固定時(shí)間在lh以內(nèi)。時(shí)間太長(zhǎng)，有的反應(yīng)產(chǎn)物也會(huì)被溶
解。后固定后要充分漂洗，再保存于二甲腫酸鈉緩沖液中，4℃可
保存幾天再包埋。

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